晚清上有兩個驚心動魄的時刻。

一個是光緒三十四年十月二十一日酉正二刻三分，即1908年11月1日下午5時33分。光緒帝死亡，終年37歲。

另一個是光緒三十四年十月二十二日未時，即下午1時至3時。太后在儀鸞殿死亡。

也就是說，在22小時之內，這對母子相繼去世，死亡時間的詭異與巧合，光緒帝與慈禧之間早已存在的政治矛盾，不得不讓人感覺，光緒帝的死亡背后，深藏著一個驚心而巨大的陰謀。由此，繁衍出種種猜測和議論。

第一種說法：慈禧知道自己即將歸西天，不愿意在她死后，光緒皇帝重新掌權，派人毒死了光緒帝。主要依據有清末給光緒看病的名醫屈桂庭在他的回憶錄中說：“光緒在臨死前三天，在床上不停地翻滾，并且不停地大叫，‘肚子疼得不得了。

臉色發暗，舌頭又黃又黑，明顯是中毒癥狀。”根據這種說法，光緒是被毒死的，最大的嫌疑人是慈禧太后，因為她是當時最有權勢，又嚴密控制光緒帝的、最好下毒、最可能下毒的人。

此說法的依據和記錄有《清室外記》、《清裨類抄》和《崇陵傳信錄》。

第二種說法：袁世凱見慈禧一病難起，怕慈禧死后，光緒掌握實權，報復自己在戊戌變法時出賣皇帝的行為，于是賄賂宮廷宦官，用劇毒藥物害死光緒帝。

這種說法最有權威的依據是清朝最后一個皇帝溥儀的說法，溥儀說：“我親耳聽到一個侍候光緒帝的老太監講：‘光緒帝死前一天，只是用了一劑藥，才變壞的。后來才知道這劑藥是袁世凱送的。’”

第三種說法：太監李蓮英得悉光緒帝的日記中載有西太后死后將誅袁世凱和他的消息，與慈禧一起陰謀將毒藥投入光緒帝的食物中致使光緒帝中毒身亡。

第四種說法：這幾年來有專家根據光緒帝生前的病歷，結合當時的歷史背景和現代中醫學理論，推斷光緒帝是因為嚴重肺結核病加上其他并發癥，導致死亡的。

歷史背景的根據是光緒二十五年正月初二日，太醫朱琨等為光緒帝診得脈案：“口渴思飲，喉癢嗆咳，氣不舒暢，心煩而悸，不耐事擾，時作太息。目中白睛紅絲未凈，視物朦朧……耳內覺聾，時做轟聲。胸中發堵，呼吸語言，丹田氣覺不足……夜寐少眠，醒后筋脈覺僵，難以轉側……”

第五種說法：光緒帝有嚴重的腎虧，加上光緒帝從小身體虛弱，幼多病有長期遺精史。《病原述略》中說：“遺精之病將二十年，前數年每月必發十數次，近數年每月不過二三次……冬天較甚。近數年遺泄較少者，并非較愈，乃系腎經虧損太甚，無力發泄之故。”

光緒帝有這樣一種病癥，再加上從幾歲起就受慈禧的壓制，長期處在緊張之中，后來在做皇帝時更是經歷一連串的挫折和打擊，病情逐漸加重，引起一系列呼吸道、消化道等并發病癥，最后病亡。這一說法主要依據是光緒生前的病歷和光緒生前自己的一段回憶。

究竟哪一個說法更接近于事實呢？光緒帝的確切死因到底是什么？史學界關于光緒死因的辯論從未停止，懷疑謀殺說和正常死亡說幾經交鋒，卻一直沒能形成學術定論。

而據最新的研究認為，光緒帝是死于砒霜中毒。中國原子能研究院反應堆工程研究設計所、北京市公安局法醫鑒定中心，先后提取了光緒分別長26厘米、65厘米的兩小縷頭發，清洗后晾干，剪成1厘米長的截段，逐一編號、稱重和封裝，然后用核分析方法逐段檢測光緒頭發中的元素含量。

結果顯示，光緒頭發中含有高濃度的元素砷，且各截段含量差異很大，第1縷頭發的砷高峰值出現在第10段(2404微克/克)，第2縷頭發的砷高峰值出現在第26段(362.7微克/克)和第45段(202.1微克/克)。

而同時對比測試的頭發砷含量，當代人為0.14~0.59微克/克，與光緒同時代并埋在一起的隆裕皇后為9.20微克/克，清末一個草料官干尸頭發為18.2微克/克。

后來，又按照規范的法醫檢驗要求和方法，提取了光緒遺骨及衣物樣品測試，結果肩胛骨、脊椎骨和每件衣物的胃區部位、系帶和領肩部位的含砷量很高;內層衣物的含砷量大大高于外層。再對光緒棺槨內、墓內物品和陵區水土等進行對比實驗，結果表明光緒頭發上的高濃度砷物質并非來自環境沾染。

最后他們得出結論：光緒頭發上的高含量砷并非為慢性中毒代謝產生，而是來自于外部沾染;大量的砷化合物曾存留于光緒尸體的胃腹部，尸體腐敗過程進行再分布，侵蝕了遺骨、頭發和衣物。而砷化合物也就是劇毒的砒霜。

經過測算，光緒攝入體內的砒霜總量明顯大于致死量。

按照這一研究，那么就與第一種說法一致——光緒帝是被謀殺的，那么謀害他的最大犯罪嫌疑人就是慈禧。