巴甫洛夫小時候就是個閑不住的人，經常與小伙伴們做游戲，互相追逐，跑得渾身是汗。平時，他常在菜園或果園里幫助父親干活，幫助母親洗碗碟，給弟弟洗澡。稍大些后，他還學過木匠、鐵匠。

在他86歲高齡時，仍愛好勞動，如在花園里掃地、種花、挖土、施肥、澆水、捉蟲。他曾愉快地說：“勞動后，雖然肌肉會感到疲勞和酸痛，但這會給人增添精神上爽快的健康感覺。”他還說：“在大地上勞動，使我終生保持精力充沛，我想，這是我長壽的主要基礎。”巴甫洛夫在青年時代就喜愛體操運動，并堅持了很多年，他曾被選為體操愛好者和自行車旅游醫師協會主席。

他每星期四都去練體操，并把這一天戲稱“肌肉興奮日”。據他的一位學生回憶：“這一天，這位世界上最有名的生理學家身穿白色襯衣，系著黑色‘蝴蝶’領結，興致勃勃、情緒激昂地在雙杠、吊環和其他器械上翻飛騰挪……”巴甫洛夫還愛好游泳、劃船、滑雪、跑步、玩擊木游戲（即把一些木塊、木棒疊集一起，然后站在一定距離的地方，用一段小木頭進行投擲，看誰擊的最準），直至老年，興趣猶濃。

他經常對人說：“如果不鍛煉身體，大腦就不能很好地工作。科學需要我們具有強烈的熱情并要付出繁重的勞動，沒有一個健壯的身體怎么能行呢？”70歲時，他還騎自行車進行幾十公里的旅行。70歲以后，他主要鍛煉快步走，80歲后還時常進行負重鍛煉，即肩上背著包裹長時間散步。

長年不斷的體育鍛煉，使他身體強壯，冬天根本不用穿皮褲，更不用圍圍巾。八旬高齡還以充沛的精力著書立說，從事科研工作，直至臨終前6天，他還在制訂年度工作計劃。

巴甫洛夫很注意飲食的合理與營養，他平時常吃多種蔬菜，如土豆、大蔥、甜菜、西紅柿、洋白菜等，在肉食上，他吃瘦牛肉、烤雛雞、清蒸多種活魚。主食以大麥粥、黑面包、牛奶為每天必食之物，并按時定量進餐。此外，他從不抽煙、喝酒。

巴甫洛夫生活工作井然有序，通常清晨7時左右便起床，然后做早操，8時早餐，9時便進實驗室開始他的科研工作，12時左右午餐，飯后休息片刻，閉目養神，下午1時半左右又開始工作，晚6時進餐，然后休息并從事體育活動或勞動。睡前翻閱報刊、信件等，10時半左右就寢。

他遵循著這樣一套嚴格的作息時間，并恪守了近50年，他極少有失眠或食欲不振現象，從而保證了充沛的精力。

有過這樣一件趣事：一次，實驗室里的十多名同事正為各人的手表時間準確問題爭辯，后來一位同事說：“大家不必爭了，我有個辦法，等巴甫洛夫教授登上實驗室門檻的時刻，便是下午1點50分。”

話音剛落，巴甫洛夫便走進實驗室，大家趕快一齊對表，后來經過電臺驗證，果然準確。大家都說，巴甫洛夫教授的生活制度如同鐘表一樣準確。當有人向巴甫洛夫問起長壽秘訣時，他回答說：一是節制煙酒，因抽煙喝酒會損傷人們的內臟；二是生活有規律；三是多勞動多鍛煉。他還留下一句名言：“一切頑固的憂悒和焦慮，足以給各種疾病大開方便之門。”